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大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
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BS-2887 大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
一、實(shí)驗(yàn)原理
該試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法，通過包被抗IL-2R抗體的微孔板捕獲樣本中的IL-2R，再依次加入生物素標(biāo)記抗體、HRP標(biāo)記鏈霉親和素和底物TMB顯色，顏色深淺與IL-2R濃度成正比?。
二、試劑盒組成
預(yù)包被微孔板(96孔或48孔配置)
IL-2R標(biāo)準(zhǔn)品(通常含6管梯度濃度)
生物素標(biāo)記抗體、HRP標(biāo)記鏈霉親和素
顯色液(TMB A/B液)和終止液
20×濃縮洗滌緩沖液
樣本稀釋液和封板膜?
三、樣本處理要求
血清/血漿?：采集后需離心(2000-3000g，15-20分鐘)，-20℃保存避免反復(fù)凍融?。
細(xì)胞培養(yǎng)上清?：離心去除沉淀后分裝保存?。
組織勻漿?：需用PBS沖洗后勻漿，離心取上清?。
四、操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：按說明書梯度稀釋(如400ng/L至25ng/L)?。
加樣?：每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本(建議設(shè)復(fù)孔)?。
孵育?：37℃孵育60-120分鐘，洗滌3-5次?。
顯色?：加入TMB避光顯色15分鐘，終止后450nm測OD值?。
五、注意事項(xiàng)
試劑使用前需平衡至室溫，避免底物接觸強(qiáng)光?。
洗滌需(建議浸泡1-2分鐘/次)，避免交叉污染?。
不同批次試劑不可混用，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋后需丟棄?。
顯色時(shí)間需嚴(yán)格控制，終止后15分鐘內(nèi)完成檢測?。
六、數(shù)據(jù)計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過回歸方程計(jì)算樣本濃度?。
七、常見問題
高背景?：可能因洗滌不充分或封閉不足導(dǎo)致?。
無信號?：檢查酶活性或抗體效價(jià)?。
重復(fù)性差?：需確保操作一致性和試劑新鮮度?。
注：以上資料僅供參考，完整操作請以實(shí)說明為準(zhǔn)，不同品牌可能存在細(xì)節(jié)差異?。
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