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　　人干擾素誘導蛋白44Elisa試劑盒說明書

　　人干擾素誘導蛋白44(IFI44)Elisa試劑盒。本說明書將為您提供詳細的使用指南，以確保您能夠準確、有效地進行實驗操作。請您在使用前仔細閱讀，并按照步驟進行操作。

　　一、產品概述 本試劑盒采用雙抗原夾心法測定標本中人干擾素誘導蛋白44(IFI44)的水平。通過純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，與待測樣品中的人干擾素誘導蛋白44結合，再與HRP標記的抗原結合，形成抗原-抗體-酶標抗原復合物。經過洗滌后，加入底物TMB顯色，以測定樣品中IFI44的含量。

　　二、實驗準備

　　1. 請確保實驗環境清潔，避免污染。

　　2. 將試劑盒及所需試劑置于室溫下平衡30分鐘。

　　3. 準備實驗所需的加樣器、移液管、試管等器材，并確保其清潔干燥。

　　三、操作步驟

　　1. 加樣：按照實驗設計，分別設置空白孔、標準孔和待測樣品孔。在酶標包被板上準確加樣50μl標準品，待測樣品孔中先加入40μl樣品稀釋液，再加入10μl待測樣品(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣時請注意，樣品應加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

　　2. 溫育：用封板膜封板后，將酶標板置于37℃恒溫箱中溫育30分鐘。

　　3. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋20倍，備用。

　　4. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干。每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

　　5. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

　　6. 再次溫育：同步驟2。

　　7. 再次洗滌：同步驟4。

　　8. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，置37℃避光顯色15分鐘。

　　9. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(此時藍色立轉黃色)。

　　10. 測定：在加終止液后15分鐘以內，使用酶標儀在450nm波長下測定各孔的光密度(OD值)。

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